2015年6月，德國波鴻魯爾大學(xué)兒童醫(yī)院的燒燒病房接收了一名7歲兒童患者。該患者患有交界性大皰性表皮松解癥（JEB），全身80%的皮膚損傷丟失。在監(jiān)護人簽署知情書、當(dāng)?shù)乇O(jiān)管機構(gòu)同意及德國波鴻魯爾大學(xué)倫理審查委員會批準(zhǔn)同情使用的前提下，醫(yī)院對這名7歲的兒童患者實施了表皮干細胞基因療法。

8個月后，也就是2016年2月，這名兒童重獲健康皮膚并出院，至今正常。北京時間11月9日凌晨，國際學(xué)術(shù)期刊《自然》（Nature）在線發(fā)表了這項由Michele De Luca等多名意大利和德國研究人員共同完成的治療成果研究。

交界性大皰性表皮松解癥，也稱致死性大皰性表皮松解癥，常呈染色體隱性遺傳?；颊咭坏┦艿捷p微創(chuàng)傷甚至與他人接觸，都會導(dǎo)致表皮透明層出現(xiàn)水皰和腐蝕。長期大面積的皮膚創(chuàng)傷嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量，這類患者通常伴有復(fù)發(fā)性感染和疤痕，更嚴(yán)重的是最終會轉(zhuǎn)變?yōu)榘┌Y。

目前，全球有大約10萬人患有不同類型的大皰性表皮松解癥（EB）。在此項研究之前，交界性大皰性表皮松解癥還沒有徹底的治療方法，能做到的僅僅是緩解痛苦的臨床癥狀。而超過40%的患者都活不到青少年時期。

此前的研究已發(fā)現(xiàn)，對交界性大皰性表皮松解癥患者來說，層粘連蛋白332是“救命”蛋白。

層粘連蛋白332是一種三異聚體蛋白，以前被稱為層粘連蛋白-5，是層粘連蛋白家族中的一個主要成員。層粘連蛋白332由LN 3、LN 3和LN 2鏈組成，并分別由LAMA3、LAMB3、LAMC3基因進行編碼，正是這三個基因的隱形遺傳的突變會導(dǎo)致交界性大皰性表皮松解癥。

除此之外，編碼XVII型膠原蛋白和6 4整合素的基因的突變也會導(dǎo)致該病。

基因突變導(dǎo)致層粘連蛋白缺失往往會使得患者出生不久后即死亡。而在幸存者身上，層粘連蛋白變得很少，半橋粒（連接層粘連蛋白和細胞骨架微絲）也退化或者沒有。

德國波鴻魯爾大學(xué)兒童醫(yī)院接收的這名7歲患者已飽受這一罕見皮膚遺傳病折磨多年。其攜帶LAMB3內(nèi)含子14純合子剪接受體突變，自出生后就出現(xiàn)全身性水皰，四肢、后背和兩肋處尤為嚴(yán)重。

這名兒童患者入院則是在病情嚴(yán)重惡化危機生命之際。在入院六周前，該兒童不幸感染有“噬肉菌”之稱的金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌。而就在醫(yī)院接收后不久，這名兒童60%總體表面積的表皮全部丟失。

研究團隊提到，在接下來的幾周，所有的治療方案都宣告失敗，而患者的近期預(yù)后（預(yù)測疾病的可能病程和結(jié)局）也很不樂觀。在傳統(tǒng)的皮膚燒燒等治療中，皮膚移植一般都采用自體皮膚“拆東墻補西墻”的方式。但對此番涉及的這名患者來說，不僅 “無墻可拆”，即使能“拆”也是同樣不健康的皮膚。

最終治療團隊決定為這名兒童實施表皮干細胞基因療法。也就是利用患者身體上無大皰區(qū)域的皮膚細胞，培養(yǎng)了原代角化細胞，并利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體對其進行基因改造以抑制LAMB3基因的非突變形式，借此重建表皮。最后將轉(zhuǎn)基因表皮移植物轉(zhuǎn)移到患者身上。

入院四個月后，也就是2015年的10月和11月，醫(yī)療團隊對患者所有丟失皮膚處（總面積近0.85平方米）都進行了移植治療。在第一次手術(shù)時，這名兒童患者80%總體表面積的表皮已完全丟失。

患者于2016年2月正式出院。論文中提到，他的表皮目前穩(wěn)定健康，和真皮連接完好，能抵抗外力損傷。沒有出現(xiàn)水皰、瘙癢等癥狀，也無需藥膏或藥物治療。

皮膚移植后的4個月、8個月、21個月，醫(yī)療人員分別對患者進行了10處隨機鉆取活檢。結(jié)果顯示，表皮均保持正常形態(tài)，研究團隊也未發(fā)現(xiàn)水皰、腐蝕或表皮和真皮分離的現(xiàn)象?；驒z測顯示再生表皮也僅由基因改造的角質(zhì)細胞組成。

移植之后，“救命”蛋白層粘連蛋白332- 3出現(xiàn)在表皮和真皮的連接處。另外，表皮的最下層基底層含有正常數(shù)量的層粘連蛋白332- 3、層粘連蛋白332- 2和 6 4整合素。研究團隊通過克隆跟蹤還發(fā)現(xiàn)，再生的表皮僅依靠數(shù)量有限的長壽命、能自我更新的干細胞來維持，這些細胞能產(chǎn)生祖細胞并最終分化成角質(zhì)細胞。絕大多數(shù)的短暫擴充細胞（表皮干細胞的子代細胞）在皮膚移植后的數(shù)周內(nèi)即逐漸消失。

研究團隊認(rèn)為，這一治療方案對早在兒童時期就被診斷為交界性大皰性表皮松解癥的患者尤為合適。研究人員建議在出生時即可采集表皮干細胞以作預(yù)防。

研究團隊總結(jié)稱，基因改造表皮干細胞能可再生形成功能完整的表皮，甚至和正常的表皮難以區(qū)分。這一成功結(jié)果同樣可以為其他類型的大皰性表皮松解癥采取干細胞基因療法相提鋪開了道路。

（原標(biāo)題：罕見皮膚遺傳病被攻克：7歲兒童通過干細胞基因療法重獲表皮）